双缩脲反应原理方程式（双缩脲反应原理）

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1、答：双缩脲试剂本是用来检测双缩脲，由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。

2、双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析化学试剂。

3、它是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由0.1g/mL 氢氧化钠或氢氧化钾、0.01g/mL硫酸铜和酒石酸钾钠配制。

4、会遇到蛋白质显紫色。

5、当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。

6、可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。

7、鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

8、双缩脲试剂中真正起作用的是 硫酸铜，而 氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。

9、向试剂中加入碘化钾，会延长试剂的使用寿命。

10、 酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。

11、[1]需要注意的是，能与双缩脲试剂发生紫色反应的化合物分子中至少含有两个肽键。

12、因此，二肽无法用它来检验。

13、一、优点：双缩脲法测定蛋白质测定范围能够是1~10mg蛋白质，操作简单、快捷。

14、既适合手工操作，又适合自动化分析，重复性好、线性关系好， 双缩脲试剂可以长期保存（ 若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制）。

15、二、缺点：灵敏度差，测定范围窄，样品需要量大，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。

16、 干扰测定的物质包括有：在性质上是氨基酸或肽的缓冲液，如TrIs缓冲液，因为它们产生阳性呈色反应，铜离子也容易被还原，有时出现红色沉淀。

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